Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis pengaruh motivasi intrinsik dan komitmen organisasi terhadap kinerja karyawan dengan Organizational Citizenship Behavior (OCB) sebagai variabel intervening. Informasi yang didapat dari penelitian ini sangat penting bagi institusi sebagai bahan pertimbangan untuk melakukan penerapan peningkatan kinerja karyawan. Subjek penelitian ini adalah karyawan tenaga kependidikan tetap tingkat fakultas di Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Teknik pengambilan sampel dalam penelitian ini adalah purposive sampling. Metode pengumpulan dengan menggunakan kuisioner dan diperoleh 77 responden. Analisis data menggunakan path analysis dua tahap dengan bantuan program SPSS 16.0. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa Motivasi Intrinsik mempunyai pengaruh positif dan signifikan terhadap OCB, Komitmen Organisasi mempunyai pengaruh positif dan signifikan terhadap OCB, Motivasi Intrinsik mempunyai pengaruh positif dan signifikan terhadap Kinerja karyawan, Komitmen Organisasi tidak mempunyai pengaruh positif dan signifikan terhadap Kinerja Karyawan, OCB mempunyai pengaruh positif dan signifikan terhadap Kinerja Karyawan, OCB memediasi secara positif pengaruh Motivasi Intrinsik terhadap Kinerja Karyawan.